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小鼠间羟肾上腺素(MN)elisa试剂盒
起订量(盒)价格
1-51680 /盒
5-101180 /盒
≥10840 /盒
  • 品牌:钦诚生物
  • 产地:上海
  • 货号:QC15442
  • 发布日期: 2019-11-28
  • 更新日期: 2024-11-28
产品详请
产地 上海
品牌 钦诚生物
货号 QC15442
用途 科研使用
数量 100
纯度 %
样本 血清、血浆、组织、相关液体
应用 科研使用酶联免疫法

   

小鼠间羟肾上腺素(MN)elisa试剂盒                

运用双抗夹心ELISA法定量测定血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中(MN)含量。

产品规格: 96T/48T

    

小鼠间羟肾上腺素(MN)elisa试剂盒组成:

 

Item

Specifications(48T/96T)

Storage

酶标板

8×6 /8×12

4°C

标准品

1 vial or 2 vial

4°C

标准品稀释液

5ml/10ml

4°C

样品稀释液

5ml/10ml

4°C

酶标检测抗体 

60ul/120ul

4°C

酶标检测抗体稀释液

5ml/10ml

4°C

TMB  A组份

2.5ml/5ml

4°C(shading light)

TMB  B组份

2.5ml/5ml

4°C

显色终止液

5ml/10ml

4°C

洗液 (25X)

15ml/30ml

4°C

封板贴

3/5pieces


说明书

1 copy


 

注意事项:

 

1.酶标板袋拆封后,尽快将不用的板孔放回,并放入干燥剂,保持酶标板干燥。

2.用户在初次使用试剂盒时,应将试剂盒平衡至室温,各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。

3TMB A液避光保存。

4,洗板过程非常重要,不充分的洗板易导致假阳性。

5.建议所有标准品、样本都做双份检测。

6.请保持试验过程的连续性,禁止酶标板干燥,因干燥会使酶标板上的生物成分迅速失活。

7.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和试管。

8.禁止混用不同批次试剂盒内的试剂。

 

试验所需自备物品:

1. 酶标仪(450nm波长滤光片)

2. 37恒温箱,双蒸水或去离子水

3. 自动洗板机

4. 高精度移液器, EP管及一次性吸头: 0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL

5. 吸水纸

 

 洗板方法:

手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的PBtTBT洗涤缓冲液 至少 0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

 

样品收集:

1.血清:全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。

2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA或肝素,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂样品。

3.组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mLPBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。然后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。

4.细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。

5.其它生物样品:1000×g离心20分钟,取上清即可检测

6.样品应清澈透明,悬浮物应离心去除。

7.样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃6个月内检测),避免反复冻融。

 

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温;试剂或样品配制时,均需充分混匀,并尽量避免起泡。

1.  加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加标准品稀释液 100μL,余孔分别加样品稀释液50ul和样品 50μL,注意不要有气泡,轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜,37℃孵育30分钟。

2.  洗板3次,弃去液体,甩干或吸干。每个孔中加入配制好的酶标抗体工作液 100μL(在使用前30 分钟内配制),酶标板加上覆膜,37℃温育30分钟。

3.  弃去孔内液体,甩干,洗板 5 次,每次浸泡 1-2 分钟, 350μL/每孔,甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。

4.  提前将TMB A组分和B组分37℃温育15分钟

5.  按用量11混合TMB A组分和B形成TMB工作液(用干净的枪头分别吸取B组分和A组分),每孔加 (TMB工作液)90μL,酶标板加上覆膜37℃避光孵育7-10分钟(根据实际显色,情况酌情缩短或延长,但不可超过 30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。

7.  每孔加终止液 50μL,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物溶液的加入顺序相同。

8.  立即用酶标仪在 450nm波长测量各孔的光密度(OD 值)。应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。

9.  实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存。

 

注意

试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在*实验后 1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。

 

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